|
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。胎牛血清是血清中的一种,是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
; }) r, M }. \$ W
/ u$ k+ s- }9 e& ~( i胎牛血清的主要作用
- Y3 n' A/ g6 I }" M' a% q3 |4 v# U- V
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
% i& G7 H- | B9 O9 `, w, q4 l% r1 ~# t3 \& S% T$ a4 q
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
* L6 R( X7 @4 [" C( `* q+ p; n+ p9 ~9 H% R6 u/ D4 a
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。& I* Z; \4 l2 O, `$ }& K& ^
. j. E t, J3 a4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。* x) H2 x8 O( q( n$ a* G
$ b# ]' L. |: ]( u5.起酸碱度缓冲液作用。$ d- ~' K) } Q5 e' [1 C4 M6 J
0 ~! ?( {7 K; J! f7 y, X0 Y
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。0 o9 X0 v& U7 Z
4 L: p0 ~0 m7 S+ T) j4 I8 O
胎牛血清的选择
' c& s' ^5 `+ y, @2 F k6 Y$ t: Q/ X" A7 r& A2 Z1 t3 G5 W
1.颜色
; C1 p4 Z' D. X' O
% D0 ~/ I, ?2 H& _( g) ]4 _根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高度对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程中严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。5 J& E! w3 }* J" U
# i" Q9 U+ j9 U3 T. B9 D y2 L5 f进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。
' q: V+ l) e0 V) s) \7 W3 Y5 z
3 k+ J6 n: r" i, u* s5 r3 ^+ u总的来说,国产的血清总呈现出蜡黄,进口的血清质量最好的呈现出淡黄、微红色。当然热灭活血清或保存不当的血清,由于红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。% @+ J9 y8 {$ Q6 G8 x
4 C, X2 k# K _2 B2.沉淀
# D! ~! o. `. G; I$ c e, X5 i' D6 G1 f, S; a3 d3 E! Z
很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
5 Q v7 C8 ]6 E9 }
1 a; T, R' p4 @2 E( ^5 ~1 W血清中的沉淀是由纤维蛋白凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。; A X3 T0 |7 t: w" Y# n- h) }
8 V, K8 J3 }( y$ P
国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产经过多次冻融,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。" b* B$ Y8 h L
6 r7 l4 x) @ }' [" f( m5 @进口的胎牛血清过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛年龄在2周左右,血清中的各种大量纤维蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
) L6 r, m0 j. P, q4 J" r, x& U
- M p) Q' q3 l2 o当然,购买回来的血清都是冷冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢融化,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
$ W+ e* z9 t, ^% J# O3 y1 r8 i; v% z* N, q# L+ G
3.澄清度
8 i! W0 I8 a5 N" @: w) n. Q) }" c4 ]# I
进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,标签为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。2 a. h8 B r9 K( I7 I4 F A" X
* n) v# A: }! I9 s* T( Z
|
|