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血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。胎牛血清是血清中的一种,是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。1 t! Z: p; K) d% O( `5 _& ?
5 T2 D5 ?7 Z2 T$ \2 V: i0 Y胎牛血清的主要作用
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1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。5 h" k% c+ V" H$ H0 _7 _$ a
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2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。
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3 e7 ]" Y1 T2 G+ N/ e( z, g' S9 Y( Z3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。3 V% @; W9 L3 n$ G7 i
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4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
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; x$ c3 y: M0 i0 _0 Y5.起酸碱度缓冲液作用。( P2 k8 Q p f9 e3 [, [, g. T
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6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
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5 h# @1 V* W4 t$ B; N胎牛血清的选择; q* g1 k& R/ w3 K. Q7 y
) b7 Z0 F* Q) b: n1.颜色. C# c; c- Y1 S$ w
7 B0 r& ]$ _+ u4 I根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高度对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程中严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。$ l# U( ]0 v- j
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进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。$ a) w3 j+ `7 @* ^. H
9 N f; @1 p2 g3 u- s$ \# Y& b+ t: u总的来说,国产的血清总呈现出蜡黄,进口的血清质量最好的呈现出淡黄、微红色。当然热灭活血清或保存不当的血清,由于红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
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3 W2 \% `+ I; X1 h$ b: C2 n8 t+ ]2.沉淀! u7 y ~6 K& v' j6 Q& v
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很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
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血清中的沉淀是由纤维蛋白凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。# S8 Y3 J" p8 ?0 P8 b: c v; G3 X. Q
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国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产经过多次冻融,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。
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" E/ E4 a1 R; r' f W进口的胎牛血清过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛年龄在2周左右,血清中的各种大量纤维蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。0 u! n8 \1 U. Z' l* I; K
j" U. U v' }) l& ?" U G当然,购买回来的血清都是冷冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢融化,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
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# ?7 a* x1 q( }6 P3.澄清度2 K/ d: I$ a5 n8 \- z
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进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,标签为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。
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