|
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。胎牛血清是血清中的一种,是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
8 [- n7 |. x# i1 l. g' ?
, [( ~+ Z& e) {) v# o胎牛血清的主要作用
5 p; C6 S, X% `( k& a+ w2 x
" I4 H& c+ \, e5 ]. R) z1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2 w, i* {! N8 K2 I+ n7 d
6 L" e7 `" x# F3 }/ g7 K
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。! l& H: \. _# N
~+ |. x4 C1 L' d3 J3 V* Q9 V
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。; V5 C1 K( g; {' D
3 b* Z/ m; B# K" k& q
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。* ]. d! x( [9 j" \+ ~, g0 P7 @
l0 R) N' i2 U+ z$ W9 x+ n
5.起酸碱度缓冲液作用。; M" O3 t: e3 L% i0 q9 x. F5 t( o6 c
4 Q0 L4 r) h: K9 B1 |% ~7 i
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。 q$ D2 w0 z \4 s1 L1 I
' k- P G: n0 ?% m# g0 _
胎牛血清的选择# d% Y+ \2 \) @7 X$ o* r
% u- r3 k5 A' _
1.颜色
( q' F4 J7 |6 W! H# }/ I. u& q/ M" ^* K2 e1 P
根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高度对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程中严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
, w5 K ? w* n b/ J h6 X T8 P
- @* k4 w- I- g/ M z, {进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。" F& x8 e6 g# X( h* F/ ^
f+ ^% n; Z$ w% o
总的来说,国产的血清总呈现出蜡黄,进口的血清质量最好的呈现出淡黄、微红色。当然热灭活血清或保存不当的血清,由于红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。) I( s( ?8 g6 }1 Q
! z# f' _* l: u/ H: j
2.沉淀
8 f# R& j" f* }+ d+ H
p9 s$ v# T) A( H很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
# y1 z4 ~: G4 `1 k
* C/ X: l# r3 N4 d/ e血清中的沉淀是由纤维蛋白凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。/ h) d7 t5 f% R$ r) g7 J
9 D+ x Y6 q) a3 O8 }国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产经过多次冻融,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。% j0 T9 O- P, o3 u/ M# W7 G a
& u' b1 r+ ?4 D% u/ B9 I; C! m进口的胎牛血清过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛年龄在2周左右,血清中的各种大量纤维蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
/ k: g1 u9 f j* j$ C' P5 g. j G% `8 `1 U* b* p/ f
当然,购买回来的血清都是冷冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢融化,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
% d( x1 D. v$ {" V% i1 J+ H" _; q2 k' \3 ~: O
3.澄清度
: j: o$ v; O* [ a0 d) N
m, N4 ~- `3 f" ?' ]: n& y& |进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,标签为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。
2 g+ ?( a9 w4 `4 S. f
* W* M% D9 v+ E3 k N; G2 G |
|